线上线下混合式-六环节实验教学实践与探索——以化学生物学实验“基于生物正交反应的蛋白质标记”为例

朱婷玉, 张晖, 章文伟, 叶德举, 李金波, 谢然

Practice and Exploration of Laboratory Teaching Based on the Mixed Online/Offline-Six-Module Didactics-Case Study: Protein Labeling Based on Bioorthogonal Reaction

Tingyu Zhu, Hui Zhang, Wenwei Zhang, Deju Ye, Jinbo Li, Ran Xie

表1 生物正交反应的蛋白质标记实验内容

模块 知识点/技术 课程内容 模块一：生物正交反应对蛋白进行荧光基团或生物素修饰 蛋白修饰的方法 生物正交反应 二喹啉甲酸(BCA)蛋白定量分析 1) 实验原理、安全注意事项讲解 2) 基于赖氨酸的蛋白质标记及超滤纯化处理 3) BCA法蛋白质定量分析 4) 基于生物正交反应的荧光基团、生物素基团修饰 5) 制备聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)样品 模块二：胶内荧光成像检测蛋白质的荧光基团标记 聚丙烯酰胺凝胶电泳 对照实验的意义和实际运用 1) SDS-PAGE、对照实验等实验原理讲解 2) 配制2块丙烯酰胺凝胶 3) SDS-PAGE分离荧光基团修饰蛋白 4) 荧光条带胶内成像、考马斯亮蓝染色成像 模块三：Western blot检测蛋白质的生物素基团标记 蛋白质免疫印迹技术 1) SDS-PAGE分离生物素基团修饰蛋白 2) Western blot检测生物素基团修饰蛋白 3) 教学立方在线测试(主观题)、师生讨论