理性改造光脱羧酶并用于反式脂肪酸选择性脱羧反应
曾森海, 鲍雨妍, 曹奡, 黄小强
Rational Evolution of a Fatty Acid Photodecarboxylase for Highly Selective Photodecarboxylation of
trans
Fatty Acid
Senhai Zeng, Yuyan Bao, Ao Cao, Xiaoqiang Huang
表1
实验课时安排
课时
实验内容
第一次课
8 h
1) 接种WT–
Cv
FAP、V453E–
Cv
FAP菌种、扩大培养、诱导表达;
2) 使用AutoDock分子对接,理解突变位点的选择;
3) 菌体收集
第二次课
8 h
1) 获得粗酶溶液;
2) 用FAD辅基定量分析酶浓度;
3) 光酶反应,并使用GC-MS进行表征
第三次课
8 h
1) 绘制底物标准曲线,计算转化率;
2) 自主探索实验条件对结果的影响;
3) 对实验结果和分子对接结果分析讨论